凍存時的操作步驟和注意細節。

操作步驟：

1.用移液器吸走原培養基，加入適量PBS洗1-2遍；

2.加入適量胰酶，置于培養箱中消化；

3.待消化到位后加入適量血清或培養基終止消化，800-1000rpm離心3-5min；

4.配制凍存液，待細胞離心后去上清，加入凍存液重懸，轉移到凍存管中；

5.將凍存管放入程序降溫盒中，-80度過夜，然后轉移到液氮中保存。